（1）間接ELISA（1ELISA）
我國(guó)現(xiàn)已建立了間接ELISA方法，但目前應(yīng)用還較少。間接ELISA試驗(yàn)中，多是以光滑型脂多糖（sLPS）作為抗原的，這些方法大多已通過田間試驗(yàn)并得到了驗(yàn)證，并正在被廣泛應(yīng)用。lELISA高度敏感，但不能鑒別牛種布氏桿菌19號(hào)疫苗接種所產(chǎn)生的抗體。不同的間接ELISA試驗(yàn)程序都比較相似，脂多糖抗原包被ELISA板，PBST洗滌后加入待檢血清，再依次加入酶標(biāo)二抗、底物和終止液，用酶標(biāo)儀測(cè)光密度值并判定結(jié)果。ELISA常用反應(yīng)率來判定結(jié)果，即樣品OD值／陽性對(duì)照OD值×100％。
間接ELISA在檢測(cè)感染牛時(shí)其敏感性等于或大于BBAT，在檢測(cè)未免疫的牛時(shí)其特異性與CFT相同。根據(jù)所設(shè)定的臨界值不同，在檢測(cè)免疫牛時(shí)其特異性可能會(huì)低于CFT。
（2）競(jìng)爭(zhēng)ELISA
我國(guó)目前還未見有布氏桿菌病競(jìng)爭(zhēng)ELISA試驗(yàn)的報(bào)道。該方法應(yīng)用了單克隆抗體，其特異性明顯高于間接ELISA。競(jìng)爭(zhēng)ELISA可以排除牛種布氏桿菌19號(hào)疫苗所產(chǎn)生抗體的影響。其試驗(yàn)程序首先為包被脂多糖抗原，PBST洗滌后加入單克隆抗體（M84），再立即加入待檢血清，溫育后再加入酶標(biāo)羊抗鼠IgG，然后依次加入底物和終止液，用酶標(biāo)儀測(cè)光密度值并判定結(jié)果。其結(jié)果常采用反應(yīng)率來判定。
競(jìng)爭(zhēng)ELISA在檢測(cè)感染牛時(shí)其敏感性等于或大于凝集試驗(yàn)，與間接ELISA相當(dāng)。在檢測(cè)未免疫牛時(shí)，其特異性等于或大于CFT和間接ELISA。在檢測(cè)牛種布氏桿菌”號(hào)近期免疫牛時(shí)，其特異性會(huì)低一些．但在檢測(cè)過往免疫動(dòng)物時(shí)，其特異性要顯著升高。
上海通蔚生物科技有限公司
地址：上海市金山區(qū)楓涇鎮(zhèn)環(huán)東一路65弄2號(hào)3463室
主營(yíng)產(chǎn)品：酶聯(lián)免疫試劑盒，農(nóng)殘檢測(cè)試劑盒，生化試劑盒，PCR試劑盒，細(xì)胞，抗原/抗體，胎牛血清等科研實(shí)驗(yàn)產(chǎn)品。
©2019 版權(quán)所有：上海通蔚生物科技有限公司 備案號(hào)：滬ICP備14033764號(hào)-3 總訪問量：1569285 站點(diǎn)地圖 技術(shù)支持：環(huán)保在線 管理登陸